明亮的单体荧光蛋白:mneongrvwin德赢娱乐平台een,mtfp1和mwasabi

詹妮弗德赢在线曾

德赢在线

我们对与等位基因生物技术的新伙伴关系令人兴奋,允许研究人员存放含有荧光蛋白mneongreen的质粒。该荧光蛋白加入MTFP1和MWASABI,作为来自等位基因生物技术的荧光团,现在可以在addgene下沉积。是什么让这些vwin德赢娱乐平台独特,可以使用什么?让我们来看看!

mneongreen:一种黄绿色荧光蛋白

mneongreen是一种黄绿色荧光蛋白,衍生自来自海洋无脊椎动物的四聚黄色荧光蛋白(Lanyfp)Branchiostoma Lanceolatum2012年。利用Scintillon Institute,佛罗里达州立大学,印第安纳大学,印第安纳大学和Karolinska学院的驻地生物科学,佛罗里达州立大学和Karolinska学院的直接演变,通过21个替换为LanyFP和增加了增强的GFP(egfp) - 泰petermini。

MneOngreen报告为最亮的单体绿色或黄色荧光蛋白当时。比最常用的GFP和yfps更亮,它比最常用的GFPS和YFPS更明亮。其激励最大值为506nm,其排放最大值为517 nm。由于MneOngreen波长位于绿色和黄色荧光蛋白波长之间,因此可以分别用标准的绿色荧光蛋白质过滤器或黄色荧光蛋白质过滤器成像,分别没有或减少排放读数。mneongreen荧光明显比gfp更亮

MneOngreen可用作融合标签,用于广泛的传统成像到FRET和随机单分子超分辨率成像的各种应用。MneOngreen也对其他常见的荧光蛋白阶段的序列同一性几乎没有,因此可用于其他荧光蛋白的免疫沉淀实验。vwin德赢娱乐平台

在这里找到mneongreen质粒!

MTFP1:单体颗粒荧光蛋白

mtpf1.是来自珊瑚的四聚青色荧光蛋白的单体形式克拉维亚SP.。蛋白质CFP484。惠万·艾伯塔大学和俄勒冈大学同事通过转换创建MTFP1E.科利用基因库大约484个变体,包括一些潜在的四聚体破裂突变。然后通过连续回合筛选图书馆的亮相诱变,用于光稳定的荧光蛋白质,具有高480/530nm排放比。vwin德赢娱乐平台它们到达一个相对于CFP484共有31个氨基酸置换的蛋白质。因为激发和发射最大值是红移(分别为462nm和492nm),所以它们给出了这种小野粒分类而不是青色,并命名蛋白质MTFP1。

研究人员建议使用MTFP1带有445/30 NM励磁滤波器,470nm Beamsplitter和495/30 NM发射滤波器。这种组合导致相对于用标准CFP集成像的信号增加2.6倍。MTFP1可用作麦克洲和生理的FRET捐赠者,或用于融合器和担心记者的活细胞成像。MTFP1对pH值的生理相关变化也不敏感。

在这里找到mtfp1质粒!

mwasabi:鲜绿色荧光蛋白

开发MTFP1的团队进一步寻求识别为什么与其亲本蛋白CFP484相比,该蛋白质的蓝移。与佛罗里达州立大学的科学家合作,他们使用了诱变方法发现,特定的氨基酸变化有助于蓝色移位。在此过程中,它们鉴定了Mwasabi,一种明亮的单体绿色荧光蛋白。

体外,Mwasabi比EGFP更亮,是光稳定的。它还具有窄的激发和发射峰(在493nm处的最大激发和509nm的最大发射),使其可用于多色标记,特别是在紫罗兰色范围内激发的荧光团。例如,Mwasabi可以与蓝宝石(激发最多399nm)一起使用,因为它在400nm时不会显着激发,而EGFP确实如此。

在这里找到mwasabi质粒!

关于这些蛋白质的最值得注意的事情之一是它们是单体荧光蛋白。vwin德赢娱乐平台vwin德赢娱乐平台荧光蛋白常将影响它们融合的蛋白质的定位和/或功能。研究人员对荧光蛋白的C-和N-末端构建了22种不同的MTFP1融合,发现融合蛋白本地化到其预期位置。对mwasabi的分析给出了类似的结果。

我们希望这篇博客文章有助于您了解为什么某些荧光蛋白最适合某些研究。vwin德赢娱乐平台如果您有含有mneongreen,mtfp1或mwasabi的质粒,请与科学界分享在addgene中沉积质粒!!


参考

艾,惠旺等。“克拉维亚青色荧光蛋白的单体,明亮和光稳定的形式的定向演变:荧光成像的结构表征和应用。”生物化学杂志400.3(2006):531-540。PubMed.PMID:16859491.。pmed中央PMCID:PMC1698604

艾,惠旺等。“Hue转移的克拉维亚青色荧光蛋白的单体变体:鉴定荧光成像中的颜色和应用的分子决定因素。”BMC生物学6.1(2008):13。PUBMEDPMID:18325109。pmed中央PMCID:PMC2292683.

Shaner,Nathan C.等人。“源自植物造疹的明亮单体绿色荧光蛋白。”自然方法10.5(2013):407。PUBMEDPMID:23524392。pmed中央PMCID:PMC3811051.

addgene博客上的其他资源vwin.com mobile

addgene.org的资源

话题:vwin德赢娱乐平台荧光成像

发表评论

分享科学刚刚变得更容易...订阅我们的博客

订阅