Crispr作弊表

泰勒福特

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Crispr作弊表

群集定期间隙的短语重复:

在细菌中发现的DNA序列,使细菌靶向并破坏感染它们的病毒。通常称为细菌免疫系统。

基因组编辑:

通常用于改变生物体的基因组的DNA序列,用于研究或应用目标。

CRISPR组件:

  • GRNA:直接CRISPR系统切割其他DNA或RNA序列的RNA序列。

  • 核酸酶:结合GRNA的蛋白质并由GRNA引导,以切割特定的DNA或RNA序列。Cas9是一种非常常用的Crispr核酸酶。

  • 笔记:来自addgene的大多数CRISPR质粒产生GRNA,核酸酶或两者。

CRISPR的应用:

  • CRISPR可用于切割DNA序列。通过修复模板,CRISPR可用于引入DNA序列中的功能变化。
  • 基础编辑器修饰版本的CRISPR核酸酶,使单碱基变为DNA序列而不完全切割DNA。
  • RNA编辑器CRISPR核酸酶切割或修饰RNA而不是DNA。将核酸酶融合给腺苷脱氨酶可以将腺苷转化为Inosine。
  • 启用/改性版本的CRISPR核酸酶不能切割用于增加或减少基因表达的DNA(例如DCAS9)。
  • 屏幕GRNA文库,具有Crispr核酸酶在细胞群中靶向多种基因。筛选所得突变细胞的感兴趣表型。

克里普尔克的局限性

  • 精确的编辑很困难。CRISPR不是100%特异性,可以切割研究人员不打算的DNA序列。
  • CRISPR无法削减所有序列。但是,素编辑和其他CAS蛋白的鉴定继续扩大靶向范围。
  • CRISPR可能很难提供。并非所有细胞有效地吸收用于生产CRISPR系统的质粒

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话题:克里普尔克CRISPR 101.

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