荧光蛋白旅行奖-蛋白质变体,血清素传感器,和一个人工叶片复制系统

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vwin德赢娱乐平台使科学家能够追求以前无法获得的创造性研究途径。有了这些工具,现在可以很容易地监测蛋白质表达、定位和蛋白质间的相互作用。除了这些常见的应用,研究人员每天都在寻找应用荧光蛋白的新方法。vwin德赢娱乐平台

已故迈克尔戴维森钱永健通过使自己的荧光蛋白质技术能够广泛利用和开发这些工具,扮演巨大的角色。为了纪念他们的遗产,我们推出了Michael Davidson和Roger Tsien纪念旅游奖在2017年。这些奖项旨在帮助早期职业科学家通过资助他们参加感兴趣的会议,与学术界分享他们基于荧光蛋白的研究。

今年,我们为申请拨打了另一个电话。我们有一个压倒性的反应,很高兴看到荧光蛋白的许多创造性用途。vwin德赢娱乐平台我们很高兴地宣布今年Michael Davidson和Roger Tsien纪念旅游奖:Melissa Chiasson,伊丽莎白·诺伯森和迈克尔伯纳赫的三个获胜者。 下载荧光蛋白101电子书vwin德赢娱乐平台

Melissa Chiasson:同时量化数千种蛋白质变异的丰度

梅丽莎Chiasson爆头随着测序能力的增加,科学家能够快速序列个体的基因组。但是当他们找到遗传变异时,这是什么意思?之前的研究表明,大约75%的蛋白质编码的致病人体变体在蛋白质丰度下降,可能是由于错误折叠。但是一次测量变形是耗时和不可规划的。

梅丽莎·恰森,一名研究生道格拉斯·福勒的实验室华盛顿大学的研究人员试图以高通量的方式解决基因变异的影响。她帮助开发了一种方法,测量序列变异对丰度的影响,同时被称为VAMP-seq, 为了V变异一个bundance由assivelyParallelseq元代。

在Vamp-SEQ中,通过将变体融合给EGFP,然后内部核糖体进入位点和麦克里,通过融合蛋白质变异文库的丰度。如果变种具有野生类型的丰富水平,EGFP将是稳定和荧光的。但如果变体不稳定,则会降低,导致EGFP荧光降低。然后通过荧光激活的细胞分选成四个箱的表达文库的细胞基于它们的EGFP:MCHERRY比分类为四个垃圾箱。然后提取来自每个垃圾箱的基因组DNA并进行测序。

Chiasson目前正在使用Vamp-SEQ学习维生素K环氧化物还原酶(VKOR)变体。VKOR是一种对激活凝血因子的关键酶,是抗凝药物华法林的靶标。在过去的研究中,已经发现了几种VKOR变体,影响身体对华法林的反应。“这些新颖的方法将有助于解释大规模的人类变异并使个性化医学成为现实,”Chiasson解释道。vamp-seq工作流程以识别蛋白质变异

Elizabeth Unger:开发血清素传感器

伊丽莎白·昂格尔头像Elizabeth Onger博士后工作的目标林天的实验室加州大学戴维斯分校的研究人员正在研制一种基因编码的血清素荧光传感器。根据昂格尔的说法,“血清素是一种众所周知但研究较少的神经调节物质,有证据表明它几乎对生活的各个方面都非常重要。”

unger开始使用细菌周质结合蛋白,类似于蛋白质的细菌性周质结合蛋白iGluSnFR传感器。然而,目前还没有已知的细菌蛋白质能够结合血清素。昂格尔重新设计了周质结合蛋白的结合袋,使其能够识别血清素。通过结合计算机建模、定向进化、位点饱和诱变和中通量筛选,她将血清素传感器的亲和力提高了四个数量级以上。

Unger通过原则式实验验证了Serotonin传感器,该实验复制了当前知识,但传感器还可以动力学越优越当前方法。起始计划使用传感器回答烧制血清onOroneric神经元的问题(使用红色测量钙传感器)导致血清素的释放(使用新开发的绿色血清素传感器测量)。

在初步研究与实验室的合作者中,他们能够在睡眠相关的研究中使用血清素传感器以及测量人血清素转运蛋白活性的测定。同性恋者还计划使用血清素受体来研究人群中存在的单一核苷酸多态性如何影响药物和剂量反应。

选择性5 -羟色胺再摄取抑制剂经常用于治疗抑郁和焦虑,但这些药物往往无效或需要几轮剂量和药物调整。昂格尔最终希望医疗专业人员能够对患者进行基因型变异,并快速检测这些变异体外针对不同的药物和剂量。血清素传感器iSeroSnFR的晶体结构

Michal Bernach:开发一个人工叶片复制系统来研究植物-细菌和细菌-细菌的相互作用

Michal Bernach爆头Michal Bernach是一名研究生Mitja Remus-Emsermann的实验室在坎特伯雷大学,他研究细菌如何相互作用和植物表面。他的选择系统是拟南芥-Pantoea agglomerans交互。

但是叶片的形状和代谢可以通过光和温度和叶片自发荧光来改变,可以干扰显微镜。因此,伯纳赫寻求开发人工叶子副本系统。“这种自下而上的方法将允许我创建一个完全可控和可重复的设置,”伯纳克解释说。

开发人造叶复制意味着产生“叶子”,具有类似的水和营养素的渗透性以及细菌的定植机会。比较人造叶子一个蒂利亚纳叶,伯纳希计划使用一套荧光记者。含有不稳定荧光蛋白的细菌在响应于水或营养水平的启动子控制下vwin德赢娱乐平台可以帮助他确定人造叶是否表现得像在这方面的生活休假。为了监测人造叶上的细菌定植,伯纳赫将使用CUSPER BIOREPORER,使得在用IPTG接种之前诱导荧光蛋白表达。vwin德赢娱乐平台在接种后没有IPTG的情况下,不再制备荧光蛋白质。vwin德赢娱乐平台作为细菌复制,将稀释荧光蛋白质,并且信号将减少。vwin德赢娱乐平台

一旦该系统被验证,伯纳赫计划使用它研究细菌种群动态与定时器生长速率生物porter。在蛋白质成熟过程中,生物porter自发地由绿色转变为橙色,非生长的细胞为橙色,生长缓慢的细胞为橙绿色,快速生长的细胞为绿色。第二个殖民者,标记着构成型荧光报告物也可以用来跟踪一个种群对第二个种群的反应。

最后,在控制细胞周期基因表达的启动子的控制下,伯纳赫将同时监测使用定时器和不稳定的荧光蛋白报告机的细胞周期和生长速率。

叶子复制品的细菌


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