作为以前的博客已经注意到，植物是地球上生命的重要基础。选择性繁殖方法已经塑造了我们成长和食用的植物，并且基因工程将继续提高植物营养，产量和耐药性。大部分植物基因工程都围绕着农杆杆菌肿瘤术。农杆菌携带“肿瘤诱导”或Ti质粒，其允许其将遗传物质转移到宿主植物基因组中。科学家们已经努力优化该系统进行基因转移，研究在植物感染期间改性Ti质粒的稳定性，以及在制备期间的质粒产率大肠杆菌。附加沉积师Indu Maiti.为植物中的瞬时和稳定基因表达应用创造了一种新的和通用二进制TI载体。这种较小的，可自定义的传染媒介功能，包括多种物种，包括烟草和拟南芥。
改善农杆菌二进制向量
设计用于使用的载体农杆菌被称为二进制向量，因为它们必须用两种物种复制：农杆菌和大肠杆菌。与其他系统中使用的质粒一样，二进制载体被克隆并预备大肠杆菌。但是，他们还需要能够复制农杆菌确保在与目标植物物种共培养期间保持它们。因此，二进制载体包含两个复制的起源，每个人大肠杆菌和农杆菌以及可选择的标记。左右T-DNA边界指定将转移到植物的DNA区域，类似于病毒载体的末端重复。vwin668It’s a lot of information to fit into a single plasmid, so most first-generation binary vectors are quite large (>10 kb.) Since transformation efficiency is inversely proportional to size, and many plant scientists want to transfer large genes, smaller binary vectors with a larger cloning capacity would be very useful: enterPSIM24！！
建立一个更好的二进制矢量，Sahoo等。从他们的实验室常用的载体开始，13 kB pkm24kh.to减少矢量尺寸，它们将T-DNA边界缩短为25个基础。通过切换大肠杆菌复制起源和密码子优化农杆菌ori，它们在两种类型的细菌中取得了更高的DNA产量和转化效率。它们还取代了调节感兴趣基因的启动子与本构强的M24启动子。最初从Mirabilis马赛克病毒中分离，组成型活性的M24启动子已被用重复的增强剂结构域改变并在烟草的研究中表征，拟南芥，和玉米。对于β-葡糖醛酸酶（GUS）和GFP记者，以及多瞬态和转基因系统，Sahoo等。显示来自M24启动子的基因表达远高于常用的35s启动子的基因表达。转基因也有效地在转基因烟草中遗传拟南芥。最后，Sahoo等人。证明这个新的矢量，PSIM24，也可以与生物方法一起使用，使其可用于不容易受到影响的工程植物农杆菌感染。
在大约7kb，PSIM24分别比市售的肉类植物和嗜磷酸乙烯载体小，PSIM24分别小，使其成为大型基因转移的理想选择。M24启动子提供组成型，高级基因表达，并且在各种植物物种中具有功能性。卡那霉素抗生素抗性基因由较弱的组成型NoS启动子控制，可用于选择两者转化的农杆菌和受感染的植物。
PSIM24的进一步的机会
虽然PSIM24的这些性质适用于许多应用，但是由于其模块化结构也可以定制质粒。两个多个克隆部位（MCS）侧翼为M24启动子，如果需要，允许将其移除并更换。总共有三个MCS区域允许插入多种调节元素，进一步自定义基因表达。Sahoo等。已经测试了该系统的长度高达4kb的基因，并通过蛋白质印迹确认了成功的蛋白质表达。鉴于其多功能性和可定制性，PSIM24不仅可以用于工厂工程和生物技术应用，而且可以用于启动子和基因表达的基础研究。
参考
Sahoo，Dipak Kumar，Nrisingha Dey和Indu Bhushan Maiti。“PSIM24是一种用于瞬时测定的新型多功能基因表达载体，以及植物中外源基因的稳定表达。”普罗斯一体9.6（2014）：E98988。PubMed Pmid：24897541。PubMed Central PMCID：4045853。
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