用一个试剂盒调节17个信号通路的活性!

由肯德尔摩根

癌症用专门针对疼痛部位的药物进行治疗,效果通常是显著的,但转瞬即逝。

“其他研究表明,在相对较短的时间内,癌症会对药物产生抗药性,尤其是靶向治疗,”他说克丽丝木杜克大学医学中心“虽然我们还没有全面了解癌症是如何产生耐药性的,但一个新兴的主题是,它们是通过激活控制生长、生存和分化等特性的信号通路来实现的。”

Sabatini Wood Cancer Pathway ORFs kit靶向通路和基因https://www.addgene.org/kits/sabatini-wood-cancer-pathway-orfs/

发现与耐药性有关的信号通路

伍德想要找出在特定环境下,是哪种特定的途径导致了对特定药物的耐药性,所以他组装了一个质粒试剂盒,专门用来实现这一目的。

作为在杂志中描述科学的信号2014年12月他和他在杜克大学的同事们,与“克隆大师”凯瑟琳·奥蒂娜(Kathleen Ottina)合作大卫•萨巴蒂他首先列出了17条信号通路,这些信号通路通常与癌细胞增殖、存活、分化和凋亡有关。对于这17种途径中的每一种,他们确定了一组1到3个突变互补dna (cdna),它们代表核心节点,当过表达时,构成性激活或灭活途径。

伍德说:“这个想法是,如果你把它们一个一个地引入细胞,你就可以识别出那些产生抗药性的细胞。”这种方法可以快速、直接、可扩展。

值得庆幸的是,研究人员不需要发现激活这些通路的新方法。相反,他们依靠发表在文献中的研究来管理完美的文库,从其他研究人员那里获得适当的cdna,并将它们克隆到慢病毒载体中生成一个试剂盒vwin668现在可用在Addgene。

“我们称之为邮寄克隆,”伍德说,从开始到完成,他们花了大约六个月的时间。他们将所有的cdna克隆到一个一致的慢病毒表达载体中,并在每一个载体上附加一个DNA条形码,使文库可以用于聚合屏幕。

肿瘤通路ORFs试剂盒的应用

Wood和他的同事开发了这种试剂盒,用于筛选导致药物耐药性的途径在体外他们已经证明了这是有效的。但是,他说,这不是使用该设备的唯一方式。

他说:“你可以用它来筛选产生任何感兴趣的表型的途径,而不仅仅是耐药性。”“它可以用来筛选不同环境下的形态特征、迁徙或生存。”

你也可以在活的动物中利用这些质粒,来探索途径,例如,赋予转移潜能或在特定环境中生存的能力。

伍德说:“世界各地的研究人员联系了我们,他们有兴趣利用我们的图书馆做一些事情——有时是药物筛选,有时是我们从未想过的完全不同的实验——这让我们很兴奋。”“我们希望尽可能广泛地提供这些服务。”

研究人员计划扩展该文库,使其包含更多癌症相关通路的激活物以及这些通路中的更多节点。在我们的支持下国家癌症研究所,他们预计在未来两年内再增加200或250个装置。


参考文献

1.Martz, Colin A等人。“系统地识别有可能授予抗癌药物耐药性的信号通路。”科学的信号7.357 (2014): ra121-ra121。PubMedPMID:25538079。公共医学中心PMCID: PMC4353587

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